ZORBAX Eclipse Plus

• 對堿性化合物分析具有出色的峰形• 對以下所有類型的樣品均表現(xiàn)出優(yōu)異的的性能（峰形、柱效、分離度和壽命）：酸性、堿性和中性化合物• 通過更嚴格的QA/QC 測試，得到出色的重現(xiàn)性• 經(jīng)過改進的、獲得專利的硅膠制造工藝，可以自始至終進行產(chǎn)品控制• 為所有分析型、高分離度、快速液相色譜分析提供多種粒徑的填料，如1.8、3.5 和5 μm對于硅膠基色譜柱而言，新的Agilent ZORBAX Eclipse Plus 色譜柱具有無與倫比的性能。即使對于非常難分離的堿性化合物，也可獲得出色的峰形，從而改善了這些類型的樣品的柱效和分離度。由于安捷倫在硅膠制造和鍵合技術方面進行了改進，因此能夠獲得這樣優(yōu)異的性能，并且這些技術完全由安捷倫控制。Eclipse Plus 柱的高性能，使其成為對所有樣品進行方法開發(fā)的首選色譜柱。如果需要進行快速方法開發(fā)并獲得出色的效率，則可以選擇具有高分離度、粒徑為1.8 μm 的色譜柱。對于標準方法，常規(guī)5 μm 柱和快速分離3.5 μm 柱是您的最佳選擇。由于提供各種粒徑的填料，因此可以方便地進行方法轉換。色譜柱通過嚴格的QA 和QC 測試，使批與批的重現(xiàn)性也得以改進，從而可以獲得所有分析的長期可靠的結果。

《量程110g精密電子天平》OHAUS電子天平代理商

DV系列分析天平（內(nèi)校）說明四：（110g-0.1mg 型號：DV114C）

植物β-葡萄糖苷酸酶（GUS）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）

試劑盒使用說明書

本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定植物組織，細胞及其它相關樣本中β-葡萄糖苷酸酶（GUS）含量。

實驗原理：

  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物β-葡萄糖苷酸酶（GUS）水平。用純化的植物β-葡萄糖苷酸酶（GUS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物β-葡萄糖苷酸酶（GUS）抗原，再與HRP標記的β-葡萄糖苷酸酶（GUS）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β-葡萄糖苷酸酶（GUS）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中植物β-葡萄糖苷酸酶（GUS）抗原濃度。

試劑盒組成：

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟：

1.         標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在、第二孔中分別加標準品100μl，然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為120ng/ml，80ng/ml，40ng/ml，20ng/ml ，10ng/ml）。

2.         加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.         配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11.     測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

注意事項：

1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3． 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物請避光保存。

7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9． 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，   

在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD     

值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋      

倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      

代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋      

倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。                  

（此圖僅供參考）

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%

檢測范圍：                                             

3ng/ml - 160ng/ml                                        

保存條件及期：

1.試劑盒保存：；2-8℃。

2．期：6個月

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